奶牛乳房炎病原菌分子诊断法的应用

说到分子诊断法，这个大家可能觉得很高大上，尤其对于我们一线工作的朋友来说，好像是完全科学研究的范畴。但是这里面我就给大家提到分子诊断法其实在未来的若干年内一定会广泛的用于在牧场里面乳房炎病原菌的诊断流程。目前来说，分子诊断法较常见的一项技术就是PCR诊断法，简单来说就是把细菌的DNA提出来，然后设计特异性的引物，引物结合到DNA上边，去扩增出很多很多的片段。当然这个片段是有一定长度的，我们通过判断这个片段的长度去推断这个是什么细菌，分子诊断法的优势是非常的明显，就是精准。这个当然是和微生物培养法相比较而言，它的精准率是非常高的，基本上如果说我们这个引物设计得非常特异性的话，那么它的准确率可以达到将近百分之百。
此外它的一个优势就是速度比较快，检测速度快，现在较快的一个PCR诊断法大概能够在4到6个小时内完成，通常我们培养细菌在24到48个小时之间，像一些比较难培养的病原菌，像支原体这样的可能得一周以上，所以说分子诊断法的优势还是很明显的。
当然分子诊断法也有他的不足之处，第一个就是价格比较昂贵。当然这个价格包括检测设备的价格，还包括检测耗材，检测成本的价格，设备通常来说一个普通的PCR仪可能就需要几万块钱，这和建一个普通的微生物实验室的价格是等同的，另外由于检测费用，由于现在的成本还是比较高的，它的费用大概是一百块钱左右。
其次，在操作方面分子诊断法也是有一定的局限性的，我们说他虽然快，但是四到六个小时需要一个人不停的操作，不像微生物培养法，虽然两天的时间，但是基本上操作的时间很少，剩下的时间是用来等待，观察结果。而对于分子诊断法，可能对于操作人员的要求是比较高的。
说到这里，目前阶段分子诊断法它用于的一个范畴是什么呢？是不是我们需要对每个临床乳房炎的致病菌、临床乳房炎的每一个样品都用分子诊断法进行检测呢？我们认为这个是不需要的，是不必要的。通常来说我认为，目前分子诊断法用于的范畴，第一个是用于大罐奶的筛查。也就是说每天我们可能有一到两份大罐奶的样品，我们通过PCR看看里面有没有这种常见的传染性致病菌，我们需要关注特殊的致病菌，我们要去看有没有金葡菌、无乳链球菌、支原体等等；如果有的话，可能对于整个牧场来说需要警惕这种传染性乳房炎的存在。
第二就是用于传染性乳房炎的筛查。如果一旦确定牧场里面存在这种传染性的致病菌，那到底哪些牛已经出现了感染呢？我们需要把这些牛的样品混合在一起，那么可能每个圈或者每十头牛混在一起，通过分子诊断法进行筛查。因为分子诊断法的精确度和灵敏性是要高于普通的微生物诊断法的。
第三个就是在乳房炎爆发的过程中。我们可能存在一些主要的致病菌，比如说有些牧场里面存在这种无乳链球菌的乳房炎的爆发，那么无乳链球菌它的传播途径和它较主要的存在位点是什么呢？这个如果我们不通过检测的话我们是不知道的，如果不知道就没有办法对它进行针对性的防控措施，这个时候我们就可以通过分子诊断法，比如说设计一条针对无乳链球菌的引物，去把这个引物用于不同样品的检测，包括奶厅的样品、乳房炎的样品、健康牛的样品、环境中、牛的皮肤的样品等等；这些我们给它进行一个检测和统一，较后我们确定无乳链球菌是通过什么途径，从牛传播到其他健康的动物上面去的，所以说是起到了一种追踪的效果。
较后我们也可以通过分子诊断法，对常规性的微生物培养法进行定期的验证，因为分子诊断法的特异性和精确性是比较高的，有时候我们就可以通过这样的验证，去判断我们微生物培养法，在这一个阶段的精准性如何。